Неинвазивный пренатальный тест (НИПТ) — скрининговая процедура, предоставляющая генетическую информацию о ребёнке. Она использует образец крови матери для анализа ДНК плаценты и плода на наличие определённых хромосомных патологий. НИПТ можно проводить ещё до первого скрининга беременности, и он не несёт никакого риска для ребёнка.
Рассказываем, как работает тест для беременных НИПТ, что показывает ДНК-скрининг, от чего зависит его точность и стоимость.
Неинвазивный пренатальный тест (НИПТ): что это?
Неинвазивный пренатальный тест (НИПТ) это способ определить риск того, что плод родится с определёнными генетическими отклонениями. Этот тест анализирует небольшие фрагменты ДНК, которые циркулируют в крови беременной женщины.
В отличие от большинства ДНК, которые находятся внутри клеточного ядра, эти фрагменты находятся в свободном плавании, а не внутри клеток, и поэтому называются бесклеточной ДНК (вкДНК).
Эти небольшие фрагменты обычно содержат менее 200 строительных блоков ДНК (пар оснований) и возникают, когда клетки отмирают и разрушаются, а их содержимое, включая ДНК, попадает в кровоток.
Во время беременности кровоток матери содержит смесь вкДНК, которая поступает из её клеток и клеток плаценты. Эти клетки попадают в кровоток матери на протяжении всей беременности.
ДНК в клетках плаценты, как правило, идентична ДНК плода. Анализ вкДНК из плаценты дает возможность раннего выявления определённых генетических аномалий без нанесения вреда ребёнку.
НИПТ проводят, если беременность связана с риском развития определённого моногенного заболевания, или для определения пола плода в контексте Х-сцепленного заболевания. Он считается диагностическим тестом, не требующим последующего инвазивного обследования, но в настоящее время НИПТ-диагностика доступна только для ограниченного спектра генетических заболеваний.
НИПТ в 10 раз более эффективен чем биохимический скрининг беременности.
Эксперты отмечают его безопасность, раннюю возможность диагностики и проведения на протяжении всей беременности.
Когда проводят НИПТ: показания к анализу крови
НИПТ чаще всего используется для поиска хромосомных нарушений, которые вызваны наличием дополнительной или отсутствующей копии (анеуплоидии) хромосомы.
НИПТ в первую очередь выявляет синдром Дауна (трисомия 21, вызванная дополнительной хромосомой 21), трисомию 18 (вызванную дополнительной хромосомой 18), трисомию 13 (вызванную дополнительной хромосомой 13) и дополнительные или отсутствующие копии X-хромосомы и Y-хромосомы (половые хромосомы).
Точность результатов НИПТ зависит от типа нарушения.
НИПТ может включать в себя скрининг на дополнительные хромосомные нарушения, которые вызваны отсутствующими (удалёнными) или скопированными (дублированными) участками хромосомы.
Кроме трисомий 13, 18 и 21 хромосомы в настоящее время также разработаны тесты НИПТ для следующих генетических состояний:
- мышечная дистрофия Дюшенна и Беккера;
- спинальная мышечная атрофия;
- врожденная гиперплазия надпочечников (только для плодов женского пола);
- муковисцидоз;
- наследственная ретинобластома;
- отдельные состояния, связанные с FGFR2 и FGFR3, такие как синдром Крузона с черным акантозом, синдром Аперта и скелетная дисплазия, связанная с FGFR3.
Индивидуальные анализы НИПТ
Для беременностей с риском других генетических заболеваний может быть разработана специальная методика для исключения отцовства. Эта форма может быть использована, если беременность связана с риском наследуемого по отцовской линии доминантного заболевания.
Этот метод также полезен, если существует риск аутосомно-рецессивного заболевания, и оба родителя являются носителями различных патогенных вариантов. В таких случаях тест на исключение отцовства позволяет подтвердить или исключить наличие отцовского варианта у плода.
Однако, если у плода обнаруживается отцовский вариант, требуется дальнейшее инвазивное исследование, чтобы определить, унаследовал ли плод также и материнский вариант.
Неинвазивное тестирование на материнский вариант гена технически проводить сложнее. Причина в том, что исследуемая внеклеточная ДНК (вкДНК) представляет собой смесь фрагментов ДНК матери и плода, и если интересующий вариант обнаружен, сложно определить, присутствует ли он только у матери или и у матери, и у плода.
Это означает, что специализированный НИПТ для материнского аутосомно-доминантного или рецессивного варианта гена пока ещё недоступен пациенткам.
Однако для небольшого числа заболеваний (в частности, спинальной мышечной атрофии) уже разработаны специальные тесты, позволяющие выявлять комбинации однонуклеотидных полиморфизмов, унаследованных по материнской линии (гаплотипы), сцепленные с вариантными или нормальными материнскими аллелями.
Важно отметить, что для проведения индивидуальных анализов требуется обследование до беременности, как для подтверждения возможности разработки анализа, так и для обеспечения возможности быстрого проведения НИПТ во время беременности.
Неинвазивное пренатальное определение пола
НИПТ также может использоваться для неинвазивного определения пола плода.
В России в соответствии с законодательством запрещён отбор эмбрионов при ЭКО по полу или позднее прерывание беременности только на основании пола плода. Однако есть исключение – связанные с полом эмбриона патологии.
Это неинвазивное пренатальное определение пола может помочь в ведении беременностей с риском развития тяжёлых заболеваний, сцеплённых с полом (например, мышечной дистрофии Дюшенна).
Его также можно использовать, чтобы избежать ненужного лечения плодов мужского пола при подозрении на врожденную гиперплазию надпочечников или в случаях, когда гениталии плода неоднозначны при ультразвуковом исследовании.
Как проводят НИПТ?
НИПТ проводится на образце материнской крови. Кровь во время беременности содержит смесь материнской и плацентарной ДНК, называемую внеклеточной ДНК (вкДНК).
Практически во всех случаях плацентарная ДНК будет репрезентативной для генома плода с точки зрения наследования небольших вариаций (таких как однонуклеотидные варианты или небольшие инсерции и/или делеции).
- ВкДНК извлекается из образца материнской крови.
- В качестве матрицы в ПЦР-реакции используется бесклеточная ДНК с праймерами, нацеленными на интересующий вариант (или, в случае неинвазивного пренатального определения пола, на Y-хромосому).
- Продукты ПЦР затем используются для целевого секвенирования нового поколения (NGS). Если вариант присутствует, небольшая доля считываний NGS, охватывающих местоположение интересующего варианта, выявит этот вариант, что указывает на его наличие у плода. Если все считывания нормальные, это означает, что плод не унаследовал этот вариант.
Для определения доли фетальной ДНК обычно используется отдельный анализ. Это важно, чтобы убедиться, что результат не ложноотрицательный из-за недостаточного количества фетальной ДНК.
Точность, плюсы и минусы НИПТ во время беременности
Учёные из Санкт-Петербургского государственного педиатрического медицинского университета отмечают: практически 100% доказательность отмечается только при диагностике трисомии по 21 хромосоме (болезни Дауна).
При других хромосомных нарушениях точность НИПТ составляет от 92 до 97%.
Кроме того, ещё недостаточно изучен процент ложноположительных и ложноотрицательных результатов при проведении НИПТ.
Что влияет на точность НИПТ
Для достоверных результатов НИПТ в крови матери должно быть достаточное количество внеплодной ДНК плода, чтобы можно было идентифицировать хромосомные аномалии плода.
Доля внеплодной ДНК в материнской крови, которая поступает из плаценты, называется фетальной фракцией, или «долей плода». Как правило, доля плода должна превышать 4%, что обычно происходит примерно на 10 неделе беременности.
Низкая доля плода может привести к невозможности проведения теста или ложноотрицательному результату НИПТ.
К причинам низкой доли плода – а значит, и низкой точности НИПТ – относятся слишком ранние сроки беременности, ошибки в отборе проб, ожирение матери и аномалии развития у ребёнка.
Учёные из ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова», Сеченовского Университета и УГМУ г. Екатеринбург в исследовании выявили, что при НИПТ в I триместре средний уровень фетальной фракции у беременных с трисомиями 18, 13 или моносомией Х значительно ниже нормы.
Во II триместре значимо более низкий уровень фетальной фракции по сравнению с нормой определялся при наличии трисомии 18 или моносомии Х.
В спорных случаях учёные советуют проводить НИПТ повторно.
Эксперты также рекомендуют женщинам с массой тела более 80-89 кг проводить обследование другими методами – ожирение значительно снижает точность НИПТ.
Преимущества НИПТ
Нет необходимости брать образец из полости матки (в отличие от инвазивной пренатальной диагностики с использованием биопсии амниотической жидкости или ворсин хориона). Это исключает небольшой риск выкидыша, связанный с инвазивными процедурами.
НИПТ можно проводить уже в 8-9 недель беременности (в зависимости от состояния, которое необходимо проверить).
Это диагностический метод: он не требуется подтверждающего инвазивного тестирования (за исключением аутосомно-рецессивных состояний, когда наличие отцовского варианта определяется с помощью теста исключения отцовства, а наличие или отсутствие материнского варианта у плода необходимо определить).
Ограничения НИПТ во время беременности
- НИПТ доступен только для ограниченного спектра генетических заболеваний.
- При многоплодной беременности (например, двойне или тройне) точность НИПТ страдает, его проведение стоит дороже, а иногда может оказаться невозможным.
- Точность НИПТ может быть крайне низкой, если родители состоят в кровном родстве или если у матери была трансплантация органов. Также доказана низкая точность при материнском ожирении и ряде синдромов (зависит от срока проведения НИПТ).
- Некоторые формы НИПТ (например, тестирование относительной дозировки гаплотипа) требуют образцов от обоих родителей и от предыдущего (здорового или больного) ребёнка.
- При тестировании относительной дозировки гаплотипа существует небольшая вероятность неоднозначного результата НИПТ из-за события рекомбинации, когда ДНК поменялась местами между хромосомами, в результате чего вариант, вызывающий заболевание, отделяется от окружающего его гаплотипа, а также есть небольшая вероятность ошибочного диагноза из-за события двойной рекомбинации.
Вопросы и ответы про НИПТ
Можно ли провести неинвазивный пренатальный тест (НИПТ) по ОМС?
НИПТ по программе ОМС доступен не везде. В некоторых регионах его можно пройти бесплатно при наличии определённых показаний, таких как промежуточный риск по результатам первого скрининга беременности. В других регионах НИПТ по ОМС обычно не входит в программу и проводится за отдельную плату.
Где можно пройти НИПТ бесплатно по ОМС:
- Москва: НИПТ включен в программу ОМС.
- Свердловская область: женщины с промежуточным риском по результатам первого скрининга беременности могут пройти НИПТ бесплатно в ГАУЗ СО «КДЦ ОЗМР».
- Другие регионы: доступность НИПТ по ОМС зависит от регионального законодательства.
Какие показания для проведения НИПТ во время беременности?
- Возраст: беременность в возрасте старше 35 лет.
- Результаты скрининга: высокий риск по результатам биохимического скрининга первого триместра.
Можно ли сдать НИПТ без направления врача?
Любая будущая мама может сделать неинвазивный пренатальный тест по желанию без направления врача самостоятельно. Однако в этом случае НИПТ не входит в программу ОМС.
Стоимость НИПТ (неинвазивного пренатального теста): сколько стоит такой скрининг беременности в России?
от 16 000 до 45 000 рублей и более, в зависимости от лаборатории и количества нарушений, на которые проверяет НИПТ.
Базовые тесты, как правило, стоят дешевле (около 18 500 — 21 500 рублей), а расширенные панели с большим количеством синдромов — дороже.
Что влияет на стоимость НИПТ:
- Количество синдромов в панели: чем больше хромосомных аномалий (например, синдромы Дауна, Эдвардса, Патау) включено в тест, тем выше его цена.
- Расширенная панель: некоторые тесты могут включать оценку статуса носительства частых мутаций или проводиться для двойни, что увеличивает стоимость.
- Комплектация: стоимость может зависеть от того, включены ли в процедуру дополнительные услуги, например, консультации врача-генетика или эмбриолога.
Об инвазивных тестах во время беременности читайте в статье «Что такое амниоцентез и зачем его делают?».
